Protein A親和層析介質(zhì)是由高度交聯(lián)的均一聚丙烯酸酯微球構(gòu)成,經(jīng)過(guò)表面修飾技術(shù)的改造,在聚合物微球表面形成一層親水性的涂層。親水性涂層的表面進(jìn)一步通過(guò)共價(jià)化學(xué)鍵引入帶Ni2+的螯合配基,其中Ni2+選擇性結(jié)合組氨酸標(biāo)簽蛋白。
在生物分子間存在很多特異性的相互作用,如我們熟悉的抗原-抗體、酶-底物或抑制劑、激素-受體等等,它們之間都能夠?qū)R欢赡娴慕Y(jié)合,這種結(jié)合力就稱(chēng)為親和力。
親和層析介質(zhì)以高度交聯(lián)的均一聚丙烯酸酯微球?yàn)榛|(zhì),具有很高的機(jī)械穩(wěn)定性且粒徑高度均一,因此,層析介質(zhì)具有抗壓縮性能,不易出現(xiàn)堵塞。并且,他可耐10MPa的壓力,支持高達(dá)2000cm/h的流速。
Protein A親和層析介質(zhì)是一種可控制孔徑和粒徑的均一多孔聚合物微球,其比表面積高達(dá)600m2/g,用其制備的親和層析介質(zhì)的功能團(tuán)密度高,因此其動(dòng)態(tài)載量高。層析介質(zhì)的動(dòng)態(tài)載量比Ni-NTA-Sepharose-FF填料的載量高1倍。
親和層析介質(zhì)粒徑均一,相對(duì)傳統(tǒng)的多糖類(lèi)介質(zhì),粒徑相對(duì)較少(30um或50um),且機(jī)械強(qiáng)度高,不易變形,因此分辨率明顯高于多糖類(lèi)介質(zhì)。
Protein A親和層析介質(zhì)是分離純化蛋白質(zhì)、酶等生物大分子而有效的層析技術(shù),分離過(guò)程簡(jiǎn)單、快速,具有很高的分辨率,在生物分離中有廣泛的應(yīng)用。同時(shí),它也可以用于某些生物大分子結(jié)構(gòu)和功能的研究。